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Was sind die Unterschiede zwischen PCR, RT-PCR, qPCR und RT-qPCR?
PCR ist eine Methode zur Amplifikation von DNA aus einer kleinen Menge einer DNA-Matrize.RT-PCR nutzt die reverse Transkription, um aus einer RNA-Quelle eine DNA-Matrize zu erzeugen, die dann amplifiziert werden kann.PCR und RT-PCR sind typischerweise Endpunktreaktionen, während qPCR und RT-qPCR die Kinetik der Produktsyntheserate nutzen...Mehr lesen -
Die Spitze der Arzneimittelentwicklung: Mit kleinen Molekülen auf RNA abzielen
Der mRNA-Impfstoff von Pfizer gegen COVID hat die Leidenschaft für die Verwendung von Ribonukleinsäure (RNA) als therapeutisches Ziel neu entfacht.Die gezielte Bekämpfung von RNA mit kleinen Molekülen ist jedoch äußerst schwierig.RNA besteht nur aus vier Bausteinen: Adenin (A), Cytosin (C), Guanin (G) und Uracil (U), das Thymin ersetzt...Mehr lesen -
Was sind Nukleinsäure-Medikamente?
„Nukleinsäure-Medikamente“ verwenden „Nukleinsäure“, also Substanzen wie DNA und RNA, die genetische Informationen steuern, als Arzneimittel.Diese ermöglichen das Targeting von Molekülen wie mRNA und miRNA, die mit herkömmlichen Medikamenten mit niedrigem Molekulargewicht und Antikörper-Medikamenten nicht angegriffen werden können, und es gibt eine g...Mehr lesen -
Einige Erfahrungen mit siRNA in der RT-PCR
1. Grundkenntnisse (wenn Sie den experimentellen Teil sehen möchten, wechseln Sie bitte direkt zum zweiten Teil) Als abgeleitete Reaktion der herkömmlichen PCR überwacht die Echtzeit-PCR hauptsächlich die Änderung der Menge des Amplifikationsprodukts in jedem Zyklus der PCR-Amplifikation Reaktion in Echtzeit durch...Mehr lesen -
Detaillierte Zusammenfassung der Methode zur Optimierung des experimentellen RT-PCR-Reaktionssystems
一、Erhöhen Sie die Empfindlichkeit des Reaktionssystems: 1. Isolieren Sie hochwertige RNA: Eine erfolgreiche cDNA-Synthese basiert auf hochwertiger RNA.Hochwertige RNA sollte mindestens in voller Länge und frei von Reverse-Transkriptase-Inhibitoren wie EDTA oder SDS sein.Die Qualität der RNA bestimmt die maximale A...Mehr lesen -
Vollständiges PCR-Primerdesign und PCR-Details
Primer-Designbasis (99 % der Probleme können gelöst werden) 1. Primerlänge: Das Lehrbuch erfordert 15-30 bp, normalerweise etwa 20 bp.Die tatsächliche Bedingung ist besser, 18–24 bp zu sein, um die Spezifität sicherzustellen, aber je länger, desto besser, ein zu langer Primer verringert auch die Spezifität und verringert die Ausbeute.2. Grund...Mehr lesen -
Vorsichtsmaßnahmen für die qRT-PCR wurden vom Oberarzt sorgfältig zusammengestellt
Alle reden über das Prinzip des qRT-PCR-Experiments, das Primerdesign, die Ergebnisinterpretation usw., aber ich denke, ich sollte Ihnen die experimentelle Funktionsweise der qRT-PCR näher bringen.Es ist zwar klein, aber es geht um Ergebnisse.Bevor wir qRT-PCR durchführen, müssen wir ein klares Verständnis unserer ... haben.Mehr lesen -
Vorsichtsmaßnahmen für RT-qPCR
Das RT-qPCR-Experiment umfasst drei Schritte der RNA-Extraktion und -Qualitätsbewertung, der reversen Transkription und der qPCR. Jeder Schritt weist viele Vorsichtsmaßnahmen auf, die wir im Folgenden ausführlich vorstellen.Ⅰ.RNA-Qualitätsbewertung Im RT-qPCR-Experiment wird nach Abschluss der RNA-Extraktion ...Mehr lesen -
Eine gründliche Einführung in die Echtzeit-PCR
1. Erstes Verständnis In dieser Phase müssen wir einige Konzepte und Terminologie verstehen, um Fehler vor unseren Senioren zu vermeiden, wie zum Beispiel: F: Was ist der Unterschied zwischen RT-PCR, qPCR, Echtzeit-PCR? und Echtzeit-RT-PCR?Antwort: RT-PCR ist eine Reverse-Transkriptions-PCR (Reverse T...Mehr lesen -
PCR, multiple PCR, In-situ-PCR, Reverse-PCR, RT-PCR, qPCR（1）– PCR
PCR, multiple PCR, In-situ-PCR, Reverse-PCR, RT-PCR, qPCR（1）– PCR Wir werden die Konzepte, Schritte und Details verschiedener PCR Ⅰ klären.Die PCR-Polymerase-Kettenreaktion, auch PCR genannt, ist eine molekularbiologische Technologie, die zur Vergrößerung spezifischer DNA-Fragmente eingesetzt wird.Es kann als... angesehen werden.Mehr lesen -
qRT-PCR-Versuchsprinzip
RT-qPCR wird aus der gewöhnlichen PCR-Technologie entwickelt.Es fügt dem herkömmlichen PCR-Reaktionssystem fluoreszierende Chemikalien (fluoreszierende Farbstoffe oder fluoreszierende Sonden) hinzu und erkennt den PCR-Annealing- und Extension-Prozess in Echtzeit anhand ihrer unterschiedlichen Lumineszenzmechanismen.Fluoreszierendes Signal...Mehr lesen -
Detaillierte Zusammenfassung der Methode zur Optimierung des experimentellen RT-PCR-Reaktionssystems
Ⅰ.Erhöhen Sie die Empfindlichkeit des Reaktionssystems: 1. Trennen Sie hochwertige RNA: Eine erfolgreiche cDNA-Synthese basiert auf hochwertiger RNA.Hochwertige RNA sollte mindestens eine Gesamtlänge gewährleisten und enthält keine Inhibitoren, die keine Aufnahmeenzyme wie EDTA oder SDS enthalten.Die Qualität...Mehr lesen
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