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Plant Total RNA Isolation Kit plus Total RNA Purificaiton Kit für Pflanzen, die reich an Polysacchariden und Polyphenolen sind

Kit-Beschreibung:

 

Kat.Nr.RE-05021/05022/05024

 

Zur Reinigung der Gesamt-RNA aus allgemeinen Pflanzenproben mit hohem Polysaccharid- und Polyphenolanteil.

Extrahieren Sie schnell hochwertige Gesamt-RNA aus Pflanzenproben mit hohem Gehalt an Polysacchariden und Polyphenolen.

RNase-frei mit DNA-Reinigungssäule

Ganz einfach: Alle Vorgänge werden bei Raumtemperatur durchgeführt

Schnell – der Vorgang kann in 30 Minuten abgeschlossen werden

Sicher – kein organisches Reagenz verwendet Vorherige Stärke


Produktdetail

Produkt Tags

FAQ

RESSOURCEN HERUNTERLADEN

Spezifikationen

50 Vorbereitungen, 200 Vorbereitungen

Das Kit nutzt die von Foregene entwickelte Spin-Säule und Formel, mit der hochreine und hochwertige Gesamt-RNA aus verschiedenen Pflanzengeweben mit hohem Polysaccharid- oder Polyphenolgehalt effizient extrahiert werden kann.Es verfügt über eine DNA-Reinigungssäule, mit der genomische DNA problemlos aus dem Überstand und dem Gewebelysat entfernt werden kann.Nur-RNA-Säulen können RNA effektiv binden.Das Kit kann eine große Anzahl von Proben gleichzeitig verarbeiten.

Das gesamte System enthält keine RNase, sodass die gereinigte RNA nicht abgebaut wird.Puffer PRW1 und Puffer PRW2 können sicherstellen, dass die gewonnene RNA nicht durch Proteine, DNA, Ionen und organische Verbindungen kontaminiert ist.

Kit-Komponenten

Puffer PSL1, Puffer PS, Puffer PSL2

Puffer PRW1, Puffer PRW2

RNase-freies ddH2O, DNA-Reinigungssäule

Nur-RNA-Säule

Merkmale und Vorteile

■ Betrieb bei Raumtemperatur (15-25℃) während des gesamten Prozesses, ohne Eisbad und Zentrifugation bei niedriger Temperatur.
■ Komplettes Kit RNase-frei, kein Grund zur Sorge über RNA-Abbau.
■ Besonders geeignet für die Aufreinigung von RNA aus Pflanzenproben von Polysacchariden und Polyphenolen.
■ Die DNA-Reinigungssäule bindet spezifisch an DNA, sodass das Kit genomische DNA-Kontaminationen ohne Zugabe von DNase entfernen kann.
■ Hohe RNA-Ausbeute: Nur-RNA-Säule und einzigartige Formel können RNA effizient reinigen.
■ Hohe Geschwindigkeit: einfach zu bedienen und innerhalb von 30 Minuten fertig.
■ Sicherheit: Es ist kein organisches Reagenz erforderlich.
■ Hohe Qualität: Die gereinigten RNA-Fragmente sind von hoher Reinheit, frei von Proteinen und anderen Verunreinigungen und können für verschiedene nachgelagerte experimentelle Anwendungen verwendet werden.

Produktparameter

■ Downstream-Anwendungen: Erststrang-cDNA-Synthese, RT-PCR, molekulares Klonen, Northern Blot usw.
■ Probe: Frisches oder gefrorenes Pflanzengewebe aus Polysacchariden und Polyphenolen
■ Dosierung: 50 mg Pflanzengewebe
■ Maximale RNA-Bindungskapazität der Reinigungssäule: 80 μg
■ Elutionsvolumen: 50–200 μl

Kit-Anwendung

Es eignet sich für die Extraktion und Reinigung von Gesamt-RNA aus frischen oder gefrorenen Pflanzengewebeproben (insbesondere frischem Pflanzenblattgewebe) mit hohem Polysaccharid- und Polyphenolgehalt.

Arbeitsablauf

Pflanzen-Gesamt-RNA – einfacher Arbeitsablauf

Diagramm

Plant Total RNA Isolation Kit Plus 6

Das Plant Total RNA Isolation Kit Plus verarbeitete 50 mg frische Blätter von Polysacchariden und Polyphenolen, und 5 % gereinigte RNA wurden durch Elektrophorese getestet.
1: Banane
2: Ginkgo
3: Baumwolle
4: Granatapfel

Lagerung und Haltbarkeit

Dieses Kit kann 24 Monate lang unter trockenen Bedingungen bei Raumtemperatur (15-25℃) gelagert werden;Wenn es über einen längeren Zeitraum gelagert werden muss, kann es bei 2–8℃ gelagert werden.
Puffer PSL1 kann nach der Zugabe von β-Mercaptoethanol einen Monat lang bei 4 °C aufbewahrt werden (es wird empfohlen, es gleichzeitig mit dem Experiment hinzuzufügen).


  • Vorherige:
  • Nächste:

  • Die Säule verstopft

    Nach dem Verstopfen der Säule ist die RNA-Ausbeute verringert oder es ist sogar unmöglich, die RNA zu reinigen, und die erhaltene RNA-Masse ist gering.

    Analyse gemeinsamer Ursachen:

    1. Probenpausen sind nicht gründlich.

    Probenbruch führt nicht vollständig zu einer Blockierung der DNA-REINIGUNGSSÄULE, beeinträchtigt jedoch die RNA-Ausbeute und -Qualität.Wir empfehlen einen schnellen Mahlvorgang in ausreichend flüssigem Stickstoff, wenn Sie die Proben zerkleinern. Versuchen Sie, die Zellwand, Zellmembran und anderes Gewebe der Probe zu zerkleinern.Für Pflanzenproben von Polyolpolysacchariden empfehlen wir die Verwendung des Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.

    2. Beim Absaugen des abgetrennten Probenüberstands mit der DNA-Reinigungssäule kann der mögliche zellfragmentierte Niederschlag eingeatmet werden.

    Die entnommenen zellfragmentierten Sedimente führen dazu, dass die NUR-RNA-Säule blockiert wird, wenn der RNA-Adsorptionsvorgang durchgeführt wird (siehe Schritt 6).Wir empfehlen Ihnen, diesen Überstand vorsichtig abzusaugen, um das Ansaugen von Zelltrümmern zu vermeiden.

    3. Die Anfangsmenge der Probe ist zu hoch.

    Eine übermäßige Probenverwendung führt zu einer unvollständigen Probenfragmentierung oder einer unvollständigen Zelllyse durch Puffer PSL1, was zu einer Verstopfung der Reinigungssäule während der Reinigung führt.Plant Total RNA Isolation Kit Jede einzelne gereinigte Betriebsprobe enthält 50 mg.Für Pflanzenproben von Polyolpolysacchariden empfehlen wir Ihnen, das Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS auszuprobieren.

    4. Die Temperatur der Zentrifuge ist zu niedrig.

    Der gesamte RNA-Isolierungs- und Reinigungsprozess wird bei Raumtemperatur (20–25 °C) durchgeführt°C), mit der Ausnahme, dass das Probengewebe durch flüssigen Stickstoff aufgebrochen wird. Die Temperatur einiger kryogener Zentrifugen liegt unter 20 °CDies kann zu einer Blockierung der DNA-Reinigungssäule und/oder der Nur-RNA-Säule führen.Stellen Sie in diesem Fall die Zentrifugentemperatur auf 20–25 °C ein, UndStellen Sie sicher, dass die Lysemischung und/oder der mit Ethanol versetzte Überstand auf 37 °C vorgewärmt wurde°C.

    Es wird keine RNA extrahiert oder die RNA-Ausbeute ist gering

    Normalerweise gibt es viele Faktoren, die die Rückgewinnungseffizienz beeinflussen, wie zum Beispiel: der RNA-Gehalt der Probe, die Betriebsmethode, das Elutionsvolumen usw.

    Analyse der häufigsten Ursachen wie folgt:

    1. Während des Vorgangs wurde ein Eisbad oder eine Zentrifugation bei niedriger Temperatur (4 °C) durchgeführt.

    Vorschlag: Bei Raumtemperatur betreiben (15–25 °C).°C) Während des gesamten Prozesses kein Eisbad und keine Zentrifugation bei niedriger Temperatur durchführen.

    2. Die RNA wurde aufgrund einer unsachgemäßen Konservierung der Probe oder einer Langzeitkonservierung der Probe abgebaut.

    Empfehlung: Frisch entnommene Proben sollten schnell in flüssigem Stickstoff eingefroren und dann für längere Zeit bei -80 °C gelagert werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen der Proben ist zu vermeiden.oder die Proben sofort in RNA-Stabilisator-RNAlater-Lösung einweichen (tierische Proben).

    3. Unzureichende Probenfragmentierung und Lyse führen zur Verstopfung der Reinigungssäule.

    Vorschlag: Stellen Sie beim Mahlen des Gewebes bitte sicher, dass das Gewebe ausreichend gemahlen ist, und übertragen Sie es schnell auf den vorbereiteten Puffer PSL1 (bestätigen Sie, dass der richtige Anteil an β-ME hinzugefügt wurde, siehe Schritt 1 des Verfahrens).

    4.Der Eluent wurde falsch hinzugefügt.

    Vorschlag: Stellen Sie sicher, dass RNase-freies ddH2O in die Mitte der Membran der Reinigungssäule getropft wird.

    5. Dem Puffer PSL2 oder dem Puffer PRW2 wurde nicht das richtige Volumen an absolutem Ethanol zugesetzt.

    Vorschlag: Bitte befolgen Sie die Anweisungen, geben Sie die richtige Menge absolutes Ethanol zu Puffer PSL2 und Puffer PRW2 hinzu und mischen Sie gut, bevor Sie das Kit verwenden.

    6. Die Menge der Gewebeprobe ist unangemessen.

    Vorschlag: Verwenden Sie 50 mg Gewebe pro 500 μl Puffer PSL1.Wenn zu viel Gewebe verwendet wird, verringert sich die Menge der extrahierten RNA und die Reinheit der resultierenden RNA wird ebenfalls verringert.Wir empfehlen dringend, dass die anfängliche Probendosis 50 mg pro RNA-Extraktionsvorgang nicht überschreiten sollte.

    7.Unangemessenes Elutionsvolumen oder unvollständige Elution.

    Vorschlag: Das Eluentenvolumen der Reinigungssäule beträgt 50–200 μl;Wenn der Elutionseffekt nicht zufriedenstellend ist, wird empfohlen, die Zeit bei Raumtemperatur nach Zugabe von vorgewärmtem RNase-freiem ddH2O zu verlängern, beispielsweise um 5–10 Minuten.

    8. Die Reinigungssäule weist nach dem Waschen mit BufferPRW2 Ethanolrückstände auf.

    Vorschlag: Wenn das leere Röhrchen 1 Minute lang zentrifugiert wird und nach dem Waschen im Puffer PRW2 noch Ethanol übrig ist, können Sie die Zeit für die Zentrifugation des leeren Röhrchens auf 2 Minuten verlängern oder die Reinigungssäule 5 Minuten lang auf Raumtemperatur stellen, um das restliche Ethanol vollständig zu entfernen.

    9. Das Kit wurde falsch verwendet.

    Vorschlag: Bei Pflanzenproben polyphenolischer Polysaccharide können mit gängigen Kits wie dem Plant Total RNA Isolation Kit möglicherweise keine idealen RNA-Proben erhalten werden.Wir empfehlen Ihnen die Verwendung des Plant Total RNA IsolationKit Plus, das speziell für polyphenolische Polysaccharid-Pflanzenproben entwickelt wurde.Ein Kit, das speziell für die Extraktion von RNA aus Polyphenol- und Polysaccharid-Pflanzenproben entwickelt wurde.

    Der OD260/OD280-Wert ist niedrig

    Die RNA-Elution mit ddH2O und die Verwendung für Spektrophotometer-Messungen führt zu niedrigen OD260/OD280-Werten.Wir empfehlen die Verwendung von 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 (anstelle von RNase-freiem ddH2O zum Eluieren von RNA), um relativ korrekte OD260/OD280-Werte zu erhalten, siehe „RNA-Konzentrations- und Reinigungstests“ auf Seite 19.

    Die gereinigte RNA wird abgebaut

    Die Qualität der gereinigten RNA hängt von Faktoren wie Probenkonservierung, RNase-Kontamination und Manipulation ab.

    Analyse häufiger Ursachen:

    1. Gewebeproben wurden nicht rechtzeitig nach der Entnahme gelagert.

    Empfehlung: Wenn die Gewebeproben nicht rechtzeitig nach der Entnahme verwendet werden, lagern Sie sie bitte sofort in flüssigem Stickstoff bei niedriger Temperatur oder übertragen Sie sie zur Langzeitlagerung nach schnellem Einfrieren in flüssigem Stickstoff auf -80 °C oder tauchen Sie die Proben sofort in die RNA-Stabilisator-RNAlater-Lösung (Tierproben).Versuchen Sie für die RNA-Extraktion frisch gesammelte Gewebeproben zu verwenden.

    2. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen von Gewebeproben.

    Vorschlag: Bei der Lagerung von Gewebeproben ist es am besten, diese zur Konservierung in kleine Stücke zu schneiden und bei der Verwendung einen Teil davon herauszunehmen, um den Abbau der RNA durch wiederholtes Einfrieren und Auftauen der Proben zu vermeiden.

    3. RNase wird im Operationssaal eingeführt oder es werden keine Einweghandschuhe, Masken usw. getragen.

    Vorschlag: RNA-Extraktionsexperimente werden am besten in separaten RNA-Vorgängen durchgeführt, der Labortisch sollte vor dem Experiment gereinigt werden und während des Experiments sollten Einweghandschuhe und -masken getragen werden, um den RNA-Abbau durch die Einführung von RNase weitestgehend zu vermeiden.

    4. Das Reagenz wird während der Verwendung durch RNase kontaminiert.

    Vorschlag: Ersetzen Sie es durch eine neue Serie pflanzlicher Gesamt-RNA-Extraktionskits für entsprechende Experimente.

    5. Die zur RNA-Manipulation verwendeten Zentrifugenröhrchen und Pipettenspitzen sind mit RNase kontaminiert.

    Vorschlag: Stellen Sie sicher, dass die bei der RNA-Extraktion verwendeten Zentrifugenröhrchen, Pipettenspitzen, Pipetten usw. alle RNase-frei sind.

    Bedienungsanleitung:

    Plant Total RNA Isolation Kit plus Bedienungsanleitung

     

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