Die Geburt der PCR
PCR (Polymerase-Kettenreaktion)
Seit der Erfindung der Polymerase-Kettenreaktion sind mehr als 30 Jahre vergangen.Seit mehr als 30 Jahren, nachdem zahlreiche Wissenschaftler auf der ganzen Welt kontinuierlich Ergänzungen und Verbesserungen vorgenommen haben, hat sich die PCR-Technologie zur am weitesten verbreiteten, am häufigsten verwendeten und wichtigsten Grundlagenforschungsmethode im gesamten Bereich der Biowissenschaften entwickelt.
Die TouchDown-PCR, die Echtzeit-PCR, die Multi-PCR usw., die auf der Grundlage der breiten Anwendung der traditionellen PCR-Technologie entwickelt wurden, sowie die neu entstandene digitale PCR (digitale PCR) haben die Forschungsmethoden der meisten wissenschaftlichen Forscher erheblich bereichert und den Entwicklungsprozess der modernen Biowissenschaften, insbesondere der Molekularbiologie, erheblich beschleunigt und einen großen Beitrag zur Erforschung des Lebens und der Natur der gesamten Menschheit geleistet.
Mängel der traditionellen PCR-Technologie
Komplexe Nukleinsäuretrennung undExtraktion:
★ Traditionelle PCR-Technologie: erforderlich
★ PCR-basierte Technologie: erforderlich
★ DNA- und RNA-Proben: große Unterschiede, schwierige Betriebsanforderungen
★ Gefahren für den Körper: Giftige Reagenzien schädigen den Körper
Die traditionelle PCR-Technologie und die Derivate-Technologie erfordern die Trennung und Reinigung von Nukleinsäuren
Jede biologische Probe muss eine Reihe komplizierter und langwieriger Probenverarbeitungen durchlaufen, um Nukleinsäureproben zu erhalten, die den Anforderungen der PCR-Technologie entsprechen.
Die Trennung und Extraktion von DNA und RNA war schon immer eine grundlegende Aufgabe, die relevante wissenschaftliche Forscher jeden Tag wiederholen müssen.
Aufgrund der großen Unterschiede zwischen den Proben sind auch die Trennungs- und Extraktionsprozesse von DNA und RNA sehr unterschiedlich.Diese Arbeiten erfordern ein hohes Maß an technischem Können der Bediener.Herkömmliche Trenn- und Extraktionstechniken erfordern einen langfristigen Kontakt mit einigen hochgiftigen chemischen Reagenzien.Dies führt zu irreversiblen Schäden am Körper des Bedieners und sogar zu direkten Schäden während des Experiments.
Gleichzeitig ist die Trennung und Extraktion von Nukleinsäuren für diejenigen, die eine große Anzahl von Proben untersuchen müssen, eine arbeitsintensive Aufgabe.
Die auf dem Markt erhältlichen Kits zur Isolierung und Extraktion von Nukleinsäuren sind mittlerweile ausgereift und es gibt viele Marken, aber sie sind ungefähr gleich.Ganz gleich, ob es sich um ein Silicagel-Membran-Säulen-Zentrifugal-Kit oder ein Kit für die Magnetkügelchen-Methode handelt, es nimmt viel Zeit in Anspruch und ist kostspielig.Neben den Kosten für den Bausatz gibt es auch besondere Anforderungen an die Laborausstattung.Der bei der Magnetkügelchen-Methode verwendete automatisierte Arbeitsplatz ist ein typisches, hochwertiges Großgerät, das einen enormen Kostenaufwand für das Labor darstellt.
Zusammenfassend
Vor der Durchführung von PCR-Experimenten ist die Vorbehandlung von Proben für Forscher unvermeidlich und bereitet immer Kopfzerbrechen.Wie dieses Problem gelöst werden kann und ob PCR-Experimente ohne die Trennung und Extraktion von Nukleinsäuren durchgeführt werden können, war schon immer die Frage der Mehrheit der wissenschaftlichen Forscher und des klinischen Laborpersonals.
Foregenes Lösung
Nach jahrelanger sorgfältiger Forschung an der Direct-PCR-Technologie und zugehörigen Kits gelang es Forgene, viele Engpässe zu überwinden und eine direkte PCR für viele Arten unterschiedlicher Proben mit hoher Resistenz und Anpassungsfähigkeit zu erreichen, sodass Forscher auf die umständliche und gefährliche Trennung und Extraktion von Nukleinsäuren verzichten konnten.Dies wird die Arbeitsintensität aller erheblich reduzieren, den Experimentierprozess beschleunigen und wissenschaftliche Forschungs- und Testkosten einsparen.
Forgenes Verständnis und Wissen über DirectPCR
Erstens ist die DirectPCR-Technologie eine direkte PCR-Technologie für verschiedene biologische Probengewebe.Unter dieser technischen Voraussetzung besteht keine Notwendigkeit, Nukleinsäuren zu trennen und zu extrahieren, und die Gewebeprobe wird direkt als Objekt verwendet und die Zielgenprimer werden für die PCR-Reaktion hinzugefügt.
Zweitens ist die DirectPCR-Technologie nicht nur eine herkömmliche DNA-Template-Amplifikationstechnologie, sondern umfasst auch die Reverse-Transkriptions-PCR von RNA-Templates.
Drittens führt die DirectPCR-Technologie nicht nur direkt routinemäßige qualitative PCR-Reaktionen an Gewebeproben durch, sondern umfasst auch Echtzeit-qPCR-Reaktionen, was erfordert, dass das Reaktionssystem über eine starke Fähigkeit verfügt, Hintergrundfluoreszenzinterferenzen zu widerstehen und endogene Fluoreszenzlöscher zu antagonisieren.
Viertens erfordern die Gewebeproben, auf die die DirectPCR-Technologie abzielt, nur die Freisetzung von Nukleinsäure-Vorlagen und entfernen keine Proteine, Polysaccharide, Salzionen usw., die die PCR-Reaktion stören.Dies erfordert, dass die Nukleinsäurepolymerase und der PCR-Mix im Reaktionssystem eine hervorragende Antireversibilität und Anpassungsfähigkeit aufweisen und die Enzymaktivität und Replikationsgenauigkeit unter komplexen Bedingungen gewährleisten können.
Fünftens wurden die Gewebeproben, auf die die DirectPCR-Technologie abzielt, keiner Nukleinsäureanreicherungsbehandlung unterzogen und die Template-Menge ist sehr gering, was eine extrem hohe Empfindlichkeit und Amplifikationseffizienz des Reaktionssystems erfordert.
Abschluss
Die DirectPCR-Technologie ist eine der wichtigsten technologischen Entwicklungen und Innovationen in den letzten 30 Jahren seit der Geburt der PCR-Technologie.Forgene war und bleibt ein Pionier und Innovator dieser Technologie.
Die Anwendungsaussichten der DirectPCR-Technologie sind sehr breit.Die kontinuierliche Verbesserung und Förderung dieser Technologie wird sicherlich subversive Veränderungen in der wissenschaftlichen Forschung und Inspektionsarbeit mit sich bringen.Dies ist eine Revolution der PCR-Technologie.
Zeitpunkt der Veröffentlichung: 21. Februar 2017
