Das Hot-Start-Taq-Enzym wird häufig verwendet.Im Vergleich zur gewöhnlichen DNA-Polymerase kann das Hot-Start-Taq-Enzym einige unspezifische Amplifikationen und die Bildung von Primerdimeren effektiv vermeiden und die Erfolgsrate der Zielgenamplifikation effektiv verbessern.Insbesondere im Bereich der Gentests hat sich das Hot-Start-Taq-Enzym als verbindlicher Standard in der Industrie herausgestellt, und gewöhnliche DNA-Polymerase sollte nicht verwendet werden.Wie aus dem oben Gesagten ersichtlich ist, werden Hot-Start-Taq-Enzyme häufig verwendet.Derzeit gibt es auf dem heimischen Markt viele Marken von Hot-Start-Taq-Enzymen, aber es gibt nicht viele Hot-Start-Taq-Enzyme von hoher Qualität.Wie sollten wir uns angesichts so vieler hochkarätiger Taq-Enzymprodukte entscheiden?

1. Wählen Sie das Hot-Start-Taq-Enzym mit hoher Amplifikationseffizienz

Die Effizienz der PCR-Amplifikation hängt eng mit der Leistung des Taq-Enzyms zusammen.Nachdem ein gutes Taq-Enzym-Reaktionssystem optimiert wurde, liegt die Amplifikationseffizienz über 95 % und der Amplifikationsbereich der anfänglichen Matrizenmenge ist groß.Eine zufriedenstellende Amplifikation kann erreicht werden, wenn der Zielgengehalt niedrig ist, und es ist nicht leicht, vergiftet zu werden, wenn die Template-Menge hoch ist und die exponentielle Amplifikationsperiode lang ist.Für das Taq-Enzym mit schlechter Leistung beträgt die Amplifikationseffizienz immer noch weniger als 90 %, selbst wenn das Reaktionssystem viele Male optimiert wurde, die „S“-Form der Amplifikationskurve ist nicht offensichtlich, die Steigung ist gering und die Kurve ist flach.Bei einer geringen Template-Menge ist eine Verstärkung nicht möglich, bei einer hohen Template-Menge ist der Verstärkungseffekt nicht ideal.Daher ist die Auswahl von DNA-Polymerasen mit hoher Amplifikationseffizienz entscheidend für den Erfolg von PCR und qPCR.

2. Wählen Sie das Hot-Start-Taq-Enzym mit starker Enzymleistung

Die enzymatische Kraft des Taq-Enzyms hängt von der Amplifikationseffizienz ab.Im Allgemeinen gilt: Je stärker die enzymatische Kraft des Hot-Start-Taq-Enzyms, desto länger die exponentielle Wachstumsperiode der PCR-Amplifikation, desto typischer die „S-förmige“ Kurve, desto höher der Fluoreszenzsignalwert und desto besser geeignet für den Multiplex-PCR-Nachweis.Marken-DNA-Polymerasen mit schwacher enzymatischer Leistung können im Allgemeinen nur 2-Plex-Reaktionen unterstützen.Bei der Durchführung von 3-Plex-Reaktionen ist die Amplifikationskurve niedrig, der Fluoreszenzsignalwert niedrig und es gibt keine typische Amplifikationskurve, sodass die Ergebnisse schwer zu beurteilen sind.

3. Wählen Sie ein Hot-Start-Taq-Enzym mit hoher Empfindlichkeit

Im Allgemeinen weist DNA-Polymerase eine hohe Amplifikationseffizienz und eine hohe Empfindlichkeit auf, es gibt jedoch auch Inkonsistenzen.Wenn die Zielgenhäufigkeit der zu amplifizierenden Probe gering ist, wird empfohlen, die Amplifikationsempfindlichkeit des Taq-Enzyms zu testen.Die gebräuchlichste Nachweismethode besteht darin, eine 10-fache oder 5-fache Gradientenverdünnung des Zielgen-Plasmidfragments durchzuführen, den PCR-Nachweis bei der niedrigeren Verdünnung durchzuführen und das Hot-Start-Taq-Enzym mit höherer Nachweisempfindlichkeit auszuwählen.

Aus dem oben Gesagten ist ersichtlich, dass Forscher ihre Auswahl entsprechend ihren eigenen experimentellen Anforderungen und Finanzierungsbedingungen treffen müssen.Am besten führen Sie ein Amplifikationsexperiment mit Gradientenverdünnung durch, um die Amplifikationseffizienz und Empfindlichkeit des Hot-Start-Taq-Enzyms zu ermitteln.

Ein Beispiel für Foregene's Taq-DNA-Polymerase:

Foreasy HS Taq DNA-Polymerase

Beschreibung

Foreasy HS Taq DNA Polymerase ist eine DNA-Polymerase, die durch Genrekombinationstechnologie in Escherichia coli-Engineering-Bakterien exprimiert wird.Das Enzym wird mit einem einzigartigen Reaktionspuffer kombiniert, der das Produkt äußerst widerstandsfähig und kompatibel macht und das Probenlysat (Foregene Lysis-System) direkt als Vorlage für Nachweisreaktionen verwenden kann.

Anwendung

Qualitativer PCR- und quantitativer PCR-Nachweis von gereinigten und nicht gereinigten Templates.

Qualitätskontrolle

1. Keine exogene Nukleaseaktivität festgestellt

2.PCR-Methode zum Nachweis restlicher genomischer DNA ohne Wirt

3.Es kann Einzelkopie-Gene im menschlichen Genom effektiv verstärken

4. Eine Woche lang bei Raumtemperatur lagern, keine offensichtlichen Aktivitätsveränderungen

Produktdetails: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/