China-Hersteller für 2-fach konzentrierte Vormischung für ungereinigte Proben, Echtzeit-quantitative PCR-Direktmultiplexsonde Qpcr Mix Plus U
Die Organisation hält an dem Verfahrenskonzept fest: „Wissenschaftliches Management, Vorrang vor hoher Qualität und Effizienz, oberster Käufer für China, Hersteller für 2× konzentrierte Vormischung für ungereinigte Proben, Echtzeit-quantitative PCR-Direkt-Multiplex-Sonde Qpcr Mix Plus U“. Unser Unternehmen ist bestrebt, Kunden bedeutende und sichere Produkte von höchster Qualität zu aggressiven Preisen anzubieten, damit jeder einzelne Kunde mit unseren Dienstleistungen zufrieden ist.
Das Unternehmen hält an dem Prozesskonzept fest: „Forschung, Qualität und Effizienz stehen an erster Stelle, der Kunde steht an erster Stelle.“China Taq DNA Polymerase und Qpcr, Unser Unternehmen verfügt über reichlich Stärke und ein stabiles und perfektes Vertriebsnetzsystem.Wir wünschen uns, dass wir auf der Grundlage gegenseitiger Vorteile solide Geschäftsbeziehungen mit allen Kunden im In- und Ausland aufbauen können.
Prinzipien des Real-Time-PCR-Primer-Designs
Vorwärts-Primer und Rückwärts-Primer
Für die Echtzeit-PCR ist das Primerdesign sehr wichtig.Primer hängen mit der Spezifität und Effizienz der PCR-Amplifikation zusammen und können unter Bezugnahme auf die folgenden Prinzipien entworfen werden:
- Primerlänge: 18–30 bp.
- GC-Gehalt: 40-60 %.
- Tm-Wert: Primer-Design-Software wie Primer 5 kann den Tm-Wert des Primers angeben.Die Tm-Werte der Upstream- und Downstream-Primer sollten möglichst nahe beieinander liegen.Es kann auch die Tm-Berechnungsformel verwendet werden: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bei der Durchführung einer PCR wird im Allgemeinen eine Temperatur unterhalb des Primer-Tm-Werts von 5 °C als Annealing-Temperatur gewählt (die entsprechende Erhöhung der Annealing-Temperatur kann die Spezifität der PCR-Reaktion erhöhen).
- Primer und PCR-Produkte:
- Die Länge des Design-Primer-PCR-Amplifikationsprodukts beträgt vorzugsweise 100–150 bp.
- Designprimer im sekundären Strukturbereich der Vorlage sollten möglichst vermieden werden.
- Vermeiden Sie die Bildung von zwei oder mehr komplementären Basen zwischen den 3′-Enden der Upstream- und Downstream-Primer.
- Die terminale Basis des Primers 3‘ kann nicht mit 3 weiteren aufeinanderfolgenden G oder C vorhanden sein.
- Die Primer selbst dürfen keine komplementären Strukturen aufweisen, da sonst eine Haarnadelstruktur entsteht, die die PCR-Amplifikation beeinträchtigt.
- ATCG sollte möglichst gleichmäßig in der Primersequenz verteilt sein und die 3′-terminale Base sollte als T vermieden werden.
Anhang1:Cell DirectRT-qPCR Kit-Komponentent Ergänzungspaket
1. Zelllyselösung
Zelllyselösung | |||
Kit-Komponenten (24-Well-Lysesystem / Well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
TeilICH | Puffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
TeilII | DNA-Radierer | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT-Mix | |
Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direkter RT-Mix | 800 μl |
RNase-freies ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-Mix | ||
Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direktes qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-Referenzfarbstoff | 40 μl | 200 μl |
RNase-freies ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Die Organisation hält an dem Verfahrenskonzept fest: „Wissenschaftliches Management, Vorrang vor hoher Qualität und Effizienz, oberster Käufer für China, Hersteller für 2× konzentrierte Vormischung für ungereinigte Proben, Echtzeit-quantitative PCR-Direkt-Multiplex-Sonde Qpcr Mix Plus U“. Unser Unternehmen ist bestrebt, Kunden bedeutende und sichere Produkte von höchster Qualität zu aggressiven Preisen anzubieten, damit jeder einzelne Kunde mit unseren Dienstleistungen zufrieden ist.
China Hersteller fürChina Taq DNA Polymerase und Qpcr, Unser Unternehmen verfügt über reichlich Stärke und ein stabiles und perfektes Vertriebsnetzsystem.Wir wünschen uns, dass wir auf der Grundlage gegenseitiger Vorteile solide Geschäftsbeziehungen mit allen Kunden im In- und Ausland aufbauen können.
Prinzipien des Real-Time-PCR-Primer-Designs
Vorwärts-Primer und Rückwärts-Primer
Für die Echtzeit-PCR ist das Primerdesign sehr wichtig.Primer hängen mit der Spezifität und Effizienz der PCR-Amplifikation zusammen und können unter Bezugnahme auf die folgenden Prinzipien entworfen werden:
- Primerlänge: 18–30 bp.
- GC-Gehalt: 40-60 %.
- Tm-Wert: Primer-Design-Software wie Primer 5 kann den Tm-Wert des Primers angeben.Die Tm-Werte der Upstream- und Downstream-Primer sollten möglichst nahe beieinander liegen.Es kann auch die Tm-Berechnungsformel verwendet werden: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bei der Durchführung einer PCR wird im Allgemeinen eine Temperatur unterhalb des Primer-Tm-Werts von 5 °C als Annealing-Temperatur gewählt (die entsprechende Erhöhung der Annealing-Temperatur kann die Spezifität der PCR-Reaktion erhöhen).
- Primer und PCR-Produkte:
- Die Länge des Design-Primer-PCR-Amplifikationsprodukts beträgt vorzugsweise 100–150 bp.
- Designprimer im sekundären Strukturbereich der Vorlage sollten möglichst vermieden werden.
- Vermeiden Sie die Bildung von zwei oder mehr komplementären Basen zwischen den 3′-Enden der Upstream- und Downstream-Primer.
- Die terminale Basis des Primers 3‘ kann nicht mit 3 weiteren aufeinanderfolgenden G oder C vorhanden sein.
- Die Primer selbst dürfen keine komplementären Strukturen aufweisen, da sonst eine Haarnadelstruktur entsteht, die die PCR-Amplifikation beeinträchtigt.
- ATCG sollte möglichst gleichmäßig in der Primersequenz verteilt sein und die 3′-terminale Base sollte als T vermieden werden.
Anhang1:Cell DirectRT-qPCR Kit-Komponentent Ergänzungspaket
1. Zelllyselösung
Zelllyselösung | |||
Kit-Komponenten (24-Well-Lysesystem / Well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
TeilICH | Puffer CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Puffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
TeilII | DNA-Radierer | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT-Mix | |
Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direkter RT-Mix | 800 μl |
RNase-freies ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR-Mix | ||
Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direktes qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX-Referenzfarbstoff | 40 μl | 200 μl |
RNase-freies ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Bedienungsanleitung: