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Beschreibungen

Dieses Kit verwendet ein einzigartiges Lysepuffersystem, das RNA aus kultivierten Zellproben für RT-qPCR-Reaktionen schnell freisetzen kann, wodurch der zeitaufwändige und mühsame RNA-Reinigungsprozess entfällt.Die RNA-Vorlage kann in nur 7 Minuten erhalten werden.Mit den im Kit enthaltenen 5×Direct RT Mix- und 2×Direct qPCR Mix-SYBR-Reagenzien können Sie schnell und effektiv quantitative PCR-Ergebnisse in Echtzeit erhalten.

5×Direct RT Mix und 2×Direct qPCR Mix-SYBR weisen eine starke Inhibitortoleranz auf und das Lysat der Proben kann direkt als Vorlage für RT-qPCR verwendet werden.Dieses Kit enthält die einzigartige hochaffine RNA-Foregene-Reverse-Transkriptase und Hot D-Taq DNA-Polymerase, dNTPs und MgCl₂, Reaktionspuffer, PCR-Optimierer und Stabilisator.

Spezifikationen

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Kit-Komponenten

Merkmale und Vorteile

■ Einfach und effektiv: Mit der Cell Direct RT-Technologie können RNA-Proben in nur 7 Minuten gewonnen werden.

■ Der Probenbedarf ist gering, es können nur 10 Zellen getestet werden.

■ Hoher Durchsatz: Es kann RNA in Zellen, die in 384-, 96-, 24-, 12- und 6-Well-Platten kultiviert wurden, schnell nachweisen.

■ DNA Eraser kann freigesetzte Genome schnell entfernen und die Auswirkungen auf nachfolgende experimentelle Ergebnisse erheblich reduzieren.

■ Das optimierte RT- und qPCR-System macht die zweistufige RT-PCR-Reverse-Transkription effizienter, die PCR spezifischer und resistenter gegen RT-qPCR-Reaktionsinhibitoren.

Kit-Anwendung

Anwendungsbereich: kultivierte Zellen.

- Durch Probenlyse freigesetzte RNA: Gilt nur für die RT-qPCR-Vorlage dieses Kits.

- Das Kit kann für folgende Zwecke verwendet werden: Genexpressionsanalyse, Überprüfung des siRNA-vermittelten Gen-Silencing-Effekts, Arzneimittelscreening usw.

Diagramm

Lagerung und Haltbarkeit

Teil I dieses Kits sollte bei 4℃ gelagert werden;Teil II sollte bei -20℃ gelagert werden.

Foregene Protease Plus II sollte bei 4℃ gelagert werden, nicht bei -20℃ einfrieren.

Reagenz 2×Direct qPCR Mix-SYBR sollte bei -20℃ im Dunkeln gelagert werden;Bei häufigem Gebrauch kann es zur kurzfristigen Lagerung auch bei 4℃ gelagert werden (Verbrauch innerhalb von 10 Tagen). Die Zufriedenheit der Verbraucher ist das Ziel unseres Unternehmens.Wir werden große Anstrengungen unternehmen, um neue und qualitativ hochwertige Waren herzustellen, Ihre exklusiven Anforderungen zu erfüllen und Ihnen Vorverkaufs-, Vorverkaufs- und Kundendienstdienstleistungen für hochwertiges China Universal Blue Sybr Green zu bietenQpcr Master MixMit Yellow Template Dilution Buffer streben wir nach kontinuierlicher Systeminnovation, Managementinnovation, Eliteinnovation und Brancheninnovation, nutzen die Gesamtvorteile voll aus und verbessern kontinuierlich die Servicequalität.
Top QualitätChina Qpcr-Vormischung, Qpcr Master Mix, Unsere inländische Website generiert jedes Jahr über 50.000 Bestellungen und ist beim Internet-Shopping in Japan recht erfolgreich.Wir würden uns über die Möglichkeit freuen, mit Ihrem Unternehmen Geschäfte zu machen.Wir freuen uns auf Ihre Nachricht!

Prinzipien des Real-Time-PCR-Primer-Designs

Vorwärts-Primer und Rückwärts-Primer

Für die Echtzeit-PCR ist das Primerdesign sehr wichtig.Primer hängen mit der Spezifität und Effizienz der PCR-Amplifikation zusammen und können unter Bezugnahme auf die folgenden Prinzipien entworfen werden:

Primerlänge: 18–30 bp.

GC-Gehalt: 40-60 %.

Tm-Wert: Primer-Design-Software wie Primer 5 kann den Tm-Wert des Primers angeben.Die Tm-Werte der Upstream- und Downstream-Primer sollten möglichst nahe beieinander liegen.Es kann auch die Tm-Berechnungsformel verwendet werden: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bei der Durchführung einer PCR wird im Allgemeinen eine Temperatur unterhalb des Primer-Tm-Werts von 5 °C als Annealing-Temperatur gewählt (die entsprechende Erhöhung der Annealing-Temperatur kann die Spezifität der PCR-Reaktion erhöhen).

Primer und PCR-Produkte:

Die Länge des Design-Primer-PCR-Amplifikationsprodukts beträgt vorzugsweise 100–150 bp.

Designprimer im sekundären Strukturbereich der Vorlage sollten möglichst vermieden werden.

Vermeiden Sie die Bildung von zwei oder mehr komplementären Basen zwischen den 3′-Enden der Upstream- und Downstream-Primer.

Die terminale Basis des Primers 3‘ kann nicht mit 3 weiteren aufeinanderfolgenden G oder C vorhanden sein.

Die Primer selbst dürfen keine komplementären Strukturen aufweisen, da sonst eine Haarnadelstruktur entsteht, die die PCR-Amplifikation beeinträchtigt.

ATCG sollte möglichst gleichmäßig in der Primersequenz verteilt sein und die 3′-terminale Base sollte als T vermieden werden.

Anhang 1: Ergänzungspaket mit Komponenten des Cell Direct RT-qPCR-Kits

1.Zelllyselösung