Blut-RNA-Isolierungskit
Kit-Beschreibung:
Katze nein.RE-04011/04013
Zur vollständigen RNA-Reinigung aus Vollblut 104 ≤ Weiße Blutkörperchen ≤ 107
Isolieren und reinigen Sie schnell Blut-RNA aus weißen Blutkörperchen.
-Sie müssen sich keine Sorgen über den RNA-Abbau machen.Das gesamte Kit ist RNase-frei
-Einfach – alle Vorgänge werden bei Raumtemperatur abgeschlossen
-Schnell – der Vorgang kann in 20 Minuten abgeschlossen werden
-Hohe RNA-Ausbeute: Nur-RNA-Säule und einzigartige Formel können RNA effizient reinigen
-Sicher – kein organisches Reagenz verwendet
-Große Probenverarbeitungskapazität – bis zu 200 μl Proben können jedes Mal verarbeitet werden.
-Hohe Qualität – die gereinigte RNA ist hochrein, frei von Proteinen und anderen Verunreinigungen und kann für verschiedene nachgelagerte experimentelle Anwendungen geeignet sein.
Beschreibungen
Das Kit nutzt die von unserem Unternehmen entwickelte Spin-Säule und Formel, mit der hochreine und hochwertige Gesamt-RNA effizient aus antikoaguliertem Vollblut extrahiert werden kann.Das Kit enthält Lysat roter Blutkörperchen (Puffer RCL), das rote Blutkörperchen schnell und effizient lysieren und weiße Blutkörperchen zurückhalten kann.Die effiziente DNA-Reinigungssäule kann den Überstand und die Zelllysate leicht trennen und genomische DNA adsorbieren und entfernen.Die Bedienung ist einfach und zeitsparend;Die RNA-only-Säule kann RNA effizient binden und mit einer einzigartigen Formel kann sie eine große Anzahl von Proben gleichzeitig verarbeiten.
Das gesamte System RNase-Free macht die extrahierte RNA nicht abbaubar;Das Pufferwaschsystem für Puffer RW1 und Puffer RW2 sorgt dafür, dass die erhaltene RNA frei von Proteinen, DNA, Ionen und Verschmutzungen durch organische Verbindungen ist.
Inhalt des Kits
| Blut-Gesamt-RNA-Isolierungskit | ||
| Zusammensetzung des Kits | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 mal | 200 Mal | |
| Puffer RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Puffer BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Puffer BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Puffer RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Puffer RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNase-freies ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Nur-RNA-Säule | 50 Sätze | 200 Sätze |
| DNA-Reinigungssäule | 50 Sätze | 200 Sätze |
| Handbuch | 1 Exemplar | 1 Exemplar |
Merkmale und Vorteile
-Sie müssen sich keine Sorgen über den RNA-Abbau machen.Das gesamte Kit ist RNase-frei.
-Einfach – alle Vorgänge werden bei Raumtemperatur abgeschlossen.
-Schnell – der Vorgang kann in 20 Minuten abgeschlossen werden.
-Hohe RNA-Ausbeute: Nur-RNA-Säule und einzigartige Formel können RNA effizient reinigen.
-Sicher – kein organisches Reagenz verwendet.
-Große Probenverarbeitungskapazität – bis zu 200 μl Proben können jedes Mal verarbeitet werden.
-Hohe Qualität – die gereinigte RNA ist hochrein, frei von Proteinen und anderen Verunreinigungen und kann für verschiedene nachgelagerte experimentelle Anwendungen geeignet sein.
Kit-Parameter
Kit-Anwendung:
Es eignet sich für die Extraktion und Reinigung von Gesamt-RNA aus Säugetiervollblut.
Arbeitsablauf
Lagerbedingungen
Puffer RCL (10×) sollte bei 2–8 °C gelagert werden;Andere Komponenten des Kits können bei Raumtemperatur (15–25 °C) unter trockenen Bedingungen gelagert werden und können 12 Monate lang gelagert werden.Puffer BRL1 kann nach Zugabe von β-Mercaptoethanol (optional) 1 Monat lang bei 4 °C gelagert werden.
Hinweis: Bei Lagerung bei niedriger Temperatur neigt die Lösung zur Ausfällung.Stellen Sie sicher, dass die Lösung im Kit vor der Verwendung eine Zeit lang bei Raumtemperatur aufbewahrt wird.Bei Bedarf 10 Minuten lang in einem 37 °C warmen Wasserbad vorwärmen, um den Niederschlag aufzulösen, und vor der Verwendung gut mischen.
Leitfäden zur Problemanalyse
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Es kann keine RNA extrahiert werden oder die Ausbeute an Nukleinsäure ist gering
Normalerweise gibt es viele Faktoren, die die Rückgewinnungseffizienz beeinflussen, wie zum Beispiel: RNA-Gehalt der Probe, Betriebsmethode, Elutionsvolumen usw.。
Analyse häufiger Ursachen:
1. Eisbad oder Zentrifugation bei niedriger Temperatur (4 ° C) während des Betriebs.
Vorschlag: Betrieb bei Raumtemperatur (15–25 °C), niemals Eisbad und Zentrifuge bei niedriger Temperatur.
2. Unsachgemäße oder zu lange Probenlagerung.
Vorschlag: Lagern Sie die Proben bei -80 °C oder frieren Sie sie in flüssigem Stickstoff ein und vermeiden Sie eine wiederholte Verwendung durch Einfrieren und Auftauen.Versuchen Sie, frisch gesammelte Proben für die RNA-Extraktion zu verwenden.
3. Unzureichende Probenlyse
Empfehlung: Bitte stellen Sie sicher, dass die Probe und die Arbeitslösung (lineares Acrylamid) gründlich gemischt und 10 Minuten bei Raumtemperatur (15–25 °C) inkubiert wurden.
4.Der Eluent wurde falsch hinzugefügt
Empfehlung: Stellen Sie sicher, dass RNase-Free ddH2O in die Mitte der Membran der Reinigungssäule gegeben wird
5. Falsches Volumen an wasserfreiem Ethanol im Puffer viRW2
Vorschlag: Bitte befolgen Sie die Anweisungen, geben Sie die richtige Menge wasserfreies Ethanol zum Puffer viRW2 hinzu und mischen Sie alles gut, bevor Sie das Kit verwenden.
6. Unsachgemäße Probenverwendung.
Vorschlag: 200 µl Probe pro 500 µl Puffer viRL.Ein zu großes Probenvolumen führt zu einer verringerten RNA-Extraktionsrate.
7. Falsches Elutionsvolumen oder unvollständige Elution.
Vorschlag: Das Eluentenvolumen der Reinigungssäule beträgt 30–50 μl;Wenn der Elutionseffekt nicht zufriedenstellend ist, wird die Zugabe von vorgewärmtem RNase-Free ddH empfohlen2O und verlängern Sie die Zeit bei Raumtemperatur, z. B. 5-10 Minuten
8. Die Reinigungssäule weist nach dem Spülen im Puffer viRW2 Ethanolrückstände auf.
Vorschlag: Wenn nach dem Spülen im Puffer viRW2 und der Zentrifugation im leeren Röhrchen für 2 Minuten noch Ethanol zurückbleibt, kann die Reinigungssäule nach der Zentrifugation im leeren Röhrchen 5 Minuten lang bei Raumtemperatur belassen werden, um das restliche Ethanol vollständig zu entfernen.
Der Abbau gereinigter RNA-Moleküle
Die Qualität der gereinigten RNA hängt von Faktoren wie Probenlagerung, RNase-Kontamination und Betrieb ab.
Analyse häufiger Ursachen:
1. Die gesammelten Proben wurden nicht rechtzeitig gespeichert.
Vorschlag: Wenn die Probe nicht rechtzeitig nach der Entnahme verwendet wird, lagern Sie sie bitte sofort bei -80 °C oder flüssigem Stickstoff.Versuchen Sie für die Extraktion von RNA-Molekülen nach Möglichkeit frisch gesammelte Proben zu verwenden.
2. Die gesammelten Proben wurden wiederholt eingefroren und aufgetaut.
Empfehlung: Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen (höchstens einmal) während der Probenentnahme und -lagerung, da sonst die Ausbeute an Nukleinsäure abnimmt.
3.RNase wurde im Operationssaal eingeführt oder es wurden keine Einweghandschuhe, Masken usw. getragen.
Vorschlag: Das Experiment zur Extraktion von RNA-Molekülen wird am besten in einem separaten RNA-Operationsraum durchgeführt und der Experimentiertisch wird vor dem Experiment gereinigt.Tragen Sie während des Experiments Einweghandschuhe und -masken, um einen durch die RNase-Einführung verursachten RNA-Abbau zu vermeiden.
4. Das Reagenz wird während der Verwendung durch RNase kontaminiert.
Vorschlag: Ersetzen Sie es durch ein neues Virus-RNA-Isolierungskit für entsprechende Experimente.
5. Die RNase-Kontamination der Zentrifugenröhrchen, Pipettenspitzen usw. Vorschlag: Stellen Sie sicher, dass die Zentrifugenröhrchen, Pipettenspitzen und Pipetten alle RNase-frei sind.
Die gereinigten RNA-Moleküle wirkten sich auf nachgelagerte Experimente aus
Die durch die Reinigungssäule gereinigten RNA-Moleküle beeinträchtigen nachfolgende Experimente, wenn zu viele Salzionen oder Proteine vorhanden sind, wie zum Beispiel: Reverse Transkription, Northern Blot usw.。
1. In den eluierten RNA-Molekülen sind noch Salzionen vorhanden.
Empfehlung: Stellen Sie sicher, dass dem Puffer viRW2 das richtige Volumen an wasserfreiem Ethanol zugesetzt wurde, und waschen Sie die Reinigungssäule zweimal entsprechend der korrekten Zentrifugationsgeschwindigkeit in der Bedienungsanleitung. Wenn noch Salzionen übrig sind, können Sie Puffer viRW2 in die Reinigungssäule geben und 5 Minuten lang bei Raumtemperatur stehen lassen.Führen Sie dann eine Zentrifugation durch, um die Verunreinigung durch Salzionen weitestgehend zu entfernen
2. In den eluierten RNA-Molekülen ist noch Ethanol enthalten
Vorschlag: Sobald Sie sich vergewissert haben, dass die Reinigungssäulen mit Puffer viRW2 gespült wurden, führen Sie eine Zentrifugation mit leerem Röhrchen gemäß der Zentrifugengeschwindigkeit in der Bedienungsanleitung durch.Sollte noch Ethanol übrig sein, kann es nach einer Leerröhrchenzentrifugation 5 Minuten bei Raumtemperatur belassen werden, um das restliche Ethanol weitestgehend zu entfernen.
Bedienungsanleitung:
Bedienungsanleitung für das virale RNA-Isolierungskit
