EndoFree Maxi Plasmid Kit (Spin Column)
Beschreibung
Das EndoFree Maxi Plasmid Kit nutzt eine einzigartige Silica-Membran-Adsorptionstechnik, um Plasmid-DNA effizient und spezifisch zu binden.Durch die Kombination des speziellen Endotoxin Removal Buffer P4 und der EndoFree Maxi Filtration Columns können Endotoxin, Proteine und andere Verunreinigungen effektiv entfernt werden.Der gesamte Extraktionsvorgang dauert nur 1 Stunde, was eine bequeme und schnelle Bedienung gewährleistet.
Empfohlene Bakterienmenge für jede Praxis: Für Plasmide mit hoher Kopienzahl wird die Verwendung von 100 ml Bakterienkulturmedium empfohlen, wobei die Ausbeute im Allgemeinen bei etwa 500–1500 μg liegt.Für Plasmide mit geringer Kopienzahl werden 200 ml Bakterienkulturmedium empfohlen, um etwa 200–600 μg Plasmide zu erzeugen.
Kit-Komponenten
Produkt Komponenten | D909-E(10 Vorbereitungen) |
Puffer BL | 30 ml |
Puffer P1 | 100 ml |
Puffer P2 | 100 ml |
Puffer P4 | 100 ml |
Puffer DW2 | 44 ml |
Puffer EB | 30 ml |
RNase A (10 mg/ml) | 1 ml |
DNAPure Maxi Spin-Säulen | 10 Stk |
FinePure Maxi-Filterspritze | 10 Stk |
50 ml Sammelröhrchen | 10 Stk |
Nachweis der Plasmid-DNA-Konzentration und -Reinheit
Die Reinheit und Konzentration der extrahierten Plasmid-DNA kann durch Agarosegelelektrophorese und ein Ultraviolett-Spektrophotometer nachgewiesen werden.Ein OD260-Wert von 1 entspricht etwa 50 μg/ml doppelsträngiger DNA.Der OD260/OD280-Wert der gereinigten Plasmid-DNA liegt im Allgemeinen im Bereich von 1,7–1,9.Die gereinigte Plasmid-DNA kann direkt für Experimente mit hohen Reinheitsanforderungen verwendet werden, wie z. B. Zelltransfektion oder In-vivo-Experimente.
Kit-Anwendung
Die mit diesem Kit extrahierte Plasmid-DNA kann für verschiedene Routinevorgänge verwendet werden, einschließlich enzymatischer Verdauung, PCR, Sequenzierung, Ligation, Transformation sowie der Transfektion für verschiedene Zelltypen.
Lagerung und Haltbarkeit
Das EndoFree Maxi Plasmid Kit kann bei Raumtemperatur (15–25 °C) unter trockenen Bedingungen bis zu 12 Monate gelagert werden.Vor der ersten Verwendung RNase A zu Puffer P1 hinzufügen, gut mischen und bei 2–8 °C lagern.Die Mischung kann mehr als 6 Monate stabil gelagert werden.