Direktes RT-qPCR-Kit
Kit-Beschreibung:
◮ Das direkte RT-qPCR-Kit, das von Foregene entwickelte Foreasy Reverse Transkriptase und Foreasy HS Taq DNA-Polymerase mit einzigartigem Reaktionspuffer verwendet, verleiht diesem Kit eine hohe Beständigkeit und Kompatibilität und kann die Reaktion direkt testen, indem das Foregene-Lysesystem als Vorlage verwendet wird.Dieses Kit kann für die Entwicklung eines Nukleinsäure-Nachweiskits für COVID-19 und anderer Nukleinsäure-Nachweiskits für pathogene Bakterien verwendet werden.
Beschreibung
Das Direct RT-qPCR Kit bietet separat verpackten RT-qPCR-Puffer und ein hocheffizientes EnzymMischung (Taq, M-MLV, RI), was die Erstellung von Back-End-Kits und -Systemen erleichtertAnpassung, im Rahmen einer einfachen Überprüfung.
Spezifikationen
500T, 50.000T
Kit-Komponenten
| Inhalt des Kits (20 μL Reaktionssystem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Direkte Enzymmischung | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direkter RT-qPCR-Puffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Anweisung | 1 | 1 |
Bedienschritte
Vor der Reagenzvorbereitung sollten alle Reagenzien im Kit bei Raumtemperatur aufgetaut und vorsichtig gemischt werden.
A: Vorbereiten of Vorlage Und Reagens
1. Bereiten Sie die vorbereitete RNA-Vorlage vor (es wird empfohlen, das Kit der Foregene Total RNA Isolation Kit-Serie zu verwenden, um die RNA-Vorlage zu extrahieren und zu reinigen) oder ein Proben-Cracking-Produkt (es wird empfohlen, das Foregene Lysis-System zu verwenden), spezifische Primer (10 μM) und andere relevante Verbrauchsmaterialien sowie ein Instrument vor.
2. Geben Sie den 2× Direct RT-qPCR-Puffer, RNase-freies ddH2O und 20× ROX-Referenzfarbstoff (falls vorhanden) hinzu'Die Zutaten werden in der Box mit Eis gemischt, damit sie auf natürliche Weise schmelzen, und vorsichtig gemischt.
B: Vorbereiten of RT-qPCR System
Tisch 1 : Vorbereiten of RT-qPCR sSystem
| Komponente | Volumen | Endgültige Konzentration |
| 2× Direkter RT-qPCR-Puffer | 10 μL | 1× |
| Direkte Enzymmischung | 1μL | |
| Vorwärtsprimer (10 μM) | 0,8 μL | 50–900 nm |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50–900 nm |
| Sonde (4 μM) | 1μL | 200 nm |
| Vorlage (RNA oder Lysat) | X μL | |
| 20×ROX-Referenzfarbstoff | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Volle Lautstärke | 20μL |
C: Satz Die RT-qPCR Reaktion Programm
Tisch 2 : RT-qPCR reaktivon Programm Einstellung (für Beispiel: zwei-Schritt Methode)
| Schritt | Temperatur | Zeit | Fahrräder | Inhalt | |
| 1 | 50℃ | 15 Minuten | 1* | 1 | Reverse Transkription |
| 2 | 95℃ | 1 Minute | 1 | Vordenaturierung | |
| 3 | 95℃ | 10 Sek | 40-45 | Denaturierung | |
| 60℃ | 30 Sek. 2* | Glühen/Verlängern | |||
Lagerung und Haltbarkeit
-Das Kit sollte bei -20 °C gelagert werden± 5℃.Die Gültigkeitsdauer beträgt 12 Monate.
-Vermeiden Sie wiederholte Frost-Tau-Zyklen (<5 Zyklen).
