ForeDirect RT-qPCR-Kit
Beschreibung
Das ForeDirect RT-qPCR Kit ist für die direkte Echtzeit-Amplifikation von RNA aus Abstrichproben ohne RNA-Reinigungsprozesse konzipiert.Dieses Kit schließt die qRT-PCR-Zyklen innerhalb einer Stunde ab.Der Enzymmix ist eine optimierte Mischung aus Reverse Transkriptase, Hot-Start Taq DNA-Polymerase und RNase-Inhibitor.Der Reaktionspuffer enthält alle erforderlichen Komponenten, einschließlich optimierter Pufferkomponenten, Mg2+, dUTP und dNTPs.
Spezifikationen
100T
Kit-Komponenten
Nukleinsäure-Freisetzungsmittel |
RNA-Schutzmittel |
2× RT-qPCR-Puffer |
Enzymmischung (Taq&M-MLV) |
Anweisungen |
PCR-Anwendung
1. Nachdem Sie die PCR-Reaktionsgefäße kurz zentrifugiert haben, stellen Sie sie in den Probentank des Amplifikationsgeräts.
2. Wärmeprotokoll
Schritt | Temperatur | Zeit | Fahrräder | |
1 | Reverse Transkription | 50℃ | 15 Minuten | 1 |
2 | Vordenaturierung | 95℃ | 1 Minute | 1 |
3 | Denaturierung | 95℃ | 10 Sekunden | 42 |
4 | Glühen/Verlängern | 60℃ | 30 Sekunden |
Notiz:Das Fluoreszenzsignal wurde unmittelbar nach dem Verlängerungsschritt jedes Zyklus festgestellt.
3. Speichern Sie nach dem Einstellen die Datei und führen Sie das Reaktionsprogramm aus.
Bedienschritte
Vor der Reagenzvorbereitung sollten alle Reagenzien im Kit bei Raumtemperatur aufgetaut und vorsichtig gemischt werden.
Reagenzvorbereitung
1. Bereiten Sie den Nukleinsäure-Freisetzungsmix vor
Komponente | Volumen pro Probe oder Kontrolle |
Nukleinsäure-Freisetzungsmittel | 5μL |
RNA-Schutzmittel | 0,5 μL |
2. Bereiten Sie die Reaktionsmischung vor
Komponente | Volumen pro Probe oder Kontrolle |
2× RT-qPCR-Puffer | 15 μL |
Enzymmischung (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
Primer und Sonden | 1μL |
Lagerung und Haltbarkeit
-Das Kit sollte bei -20 °C gelagert werden± 5℃.Die Gültigkeitsdauer beträgt 12 Monate.
-Vermeiden Sie wiederholte Frost-Tau-Zyklen (<5 Zyklen).