QuickEasyᵀᴹ Echtzeit-PCR-Kit-Taqman
Kit-Beschreibung:
◮Das einzigartige PCR-Optimierungssystem macht 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman kompatibler.
◮Die Hot-Start-Foregene-HS-Taq-Polymerase weist eine höhere Amplifikationseffizienz, eine höhere Amplifikationsempfindlichkeit und eine höhere Amplifikationsspezifität auf.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix – Taqman verwendet ein einzigartiges System, das von Foregene optimiert wurde, um die Empfindlichkeit und Spezifität des sequenzspezifischen Sondennachweises zu verbessern, der zur Genotypisierung und Bestimmung der Kopienzahlvariation verwendet werden kann und genaue Ergebnisse liefert.
◮Dieses Produkt wird mit einem internen ROX-Referenzfarbstoff geliefert, der zur Eliminierung von Signalhintergrund und Signalfehlern zwischen Wells verwendet werden kann, was für Kunden bequem in verschiedenen Arten von quantitativen PCR-Instrumenten zu verwenden ist.
Beschreibungen
Der 2× QuickEasyTMEchter PCR-Mix-Taqman, bereitgestellt von QuickEasyTMDas Real-Time-PCR-Kit-Taqman-Kit ist ein Master-Mix-System der neuen Generation, das für die Real-Time-PCR-Amplifikationsreaktion unter Verwendung spezifischer Fluoreszenzsonden entwickelt wurde.Seine Kern-Foregene-HS-Taq-DNA-Polymerase basiert auf einer Antikörpermodifikation, die in Verbindung mit dem weiter optimierten PCR-System von Foregene verwendet wird und eine höhere Spezifität und Amplifikationseffizienz aufweist.Im Vergleich zu gewöhnlichen PCR-Mischungen weist es eine stärkere Amplifikationsfähigkeit und eine geringere Fehlpaarungsrate auf.Es kann in der quantitativen Fluoreszenz-PCR-Reaktion verwendet werden, um unspezifische Amplifikation zu reduzieren und die Genauigkeit der PCR zu verbessern.Es kann die Produktspezifität und Reaktionsempfindlichkeit erheblich verbessern.Gleichzeitig wurde ROX als interner Referenzfarbstoff bereitgestellt.
Der QuickEasyTMDas Real-Time-PCR-Kit-Taqman-Kit hat einen breiten Anwendungsbereich in Bezug auf die Menge der Vorlage und kann eine gute Standardkurve in verschiedenen quantitativen Bereichen erhalten und Zielgene mit guter Wiederholbarkeit und hoher Sicherheit genau quantifizieren und nachweisen.
Spezifikationen
200 Vorbereitungen,500 Vorbereitungen,1000 Vorbereitungen,2000 Vorbereitungen
Kit-Komponenten
| QuickEasyTMEchtzeit-PCR-Kit-Taqman(20μlSystem) | ||||
| Inhalt des Kits | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 Vorbereitungen | 500 Vorbereitungen | 1000 Vorbereitungen | 2000 Vorbereitungen | |
| 2×SchnellEinfachTM Echte PCR Mischen-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
| 20×ROX-Referenzfarbstoff | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
| DNase-freies ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
| WENN DU | 1Stück | 1Stück | 1Stück | 1Stück |
Merkmale und Vorteile
■ Das einzigartige PCR-Optimierungssystem macht 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman kompatibler.
■ Die Hot-Start-Foregene-HS-Taq-Polymerase weist eine höhere Amplifikationseffizienz, eine höhere Amplifikationsempfindlichkeit und eine höhere Amplifikationsspezifität auf.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix – Taqman verwendet ein einzigartiges System, das von Foregene optimiert wurde, um die Empfindlichkeit und Spezifität des sequenzspezifischen Sondennachweises zu verbessern, der zur Genotypisierung und Bestimmung der Kopienzahlvariation verwendet werden kann und genaue Ergebnisse liefert.
■ Dieses Produkt wird mit einem internen ROX-Referenzfarbstoff geliefert, der zur Eliminierung von Signalhintergrund und Signalfehlern zwischen Wells verwendet werden kann, was für Kunden bequem in verschiedenen Arten von quantitativen PCR-Instrumenten zu verwenden ist.
Kit-Anwendung
■ Quantitative Fluoreszenz-PCR für die quantitative Template-Analyse;
■ Ckonventionelle PCR-Amplifikation;
■ Kann zur Allelerkennung verwendet werden.
Lagerung und Haltbarkeit
Das Kit sollte bei -20 °C im Dunkeln gelagert werden;Bei häufigem Gebrauch kann es auch kurzzeitig bei 4°C gelagert werden (innerhalb von 10 Tagen aufbrauchen).
Prinzipien des Real-Time-PCR-Primer-Designs
Vorwärts-Primer und Rückwärts-Primer
Für die Echtzeit-PCR ist das Primerdesign sehr wichtig.Primer hängen mit der Spezifität und Effizienz der PCR-Amplifikation zusammen und können unter Bezugnahme auf die folgenden Prinzipien entworfen werden:
Primerlänge: 18–30 bp.
GC-Gehalt: 40-60 %.
Tm-Wert: Primer-Design-Software wie Primer 5 kann den Tm-Wert des Primers angeben.Die Tm-Werte der Upstream- und Downstream-Primer sollten möglichst nahe beieinander liegen.Es kann auch die Tm-Berechnungsformel verwendet werden: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Bei der Durchführung einer PCR wird im Allgemeinen eine Temperatur unterhalb des Primer-Tm-Werts von 5 °C als Annealing-Temperatur gewählt (die entsprechende Erhöhung der Annealing-Temperatur kann die Spezifität der PCR-Reaktion erhöhen).
Primer und PCR-Produkte:
Die Länge des Design-Primer-PCR-Amplifikationsprodukts beträgt vorzugsweise 100–150 bp.
Designprimer im sekundären Strukturbereich der Vorlage sollten möglichst vermieden werden.
Vermeiden Sie die Bildung von zwei oder mehr komplementären Basen zwischen den 3′-Enden der Upstream- und Downstream-Primer.
Die terminale Basis des Primers 3‘ kann nicht mit 3 weiteren aufeinanderfolgenden G oder C vorhanden sein.
Die Primer selbst dürfen keine komplementären Strukturen aufweisen, da sonst eine Haarnadelstruktur entsteht, die die PCR-Amplifikation beeinträchtigt.
ATCG sollte möglichst gleichmäßig in der Primersequenz verteilt sein und die 3′-terminale Base sollte als T vermieden werden.
Anhang 1: Ergänzungspaket mit Komponenten des Cell Direct RT-qPCR-Kits
1.Zelllyselösung
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| Kit-Komponenten (24-Well-Lysesystem / Well) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| TeilICH | Puffer CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Puffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| TeilII | DNA-Radierer | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT-Mischung
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| Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direkter RT-Mix | 800 μl |
| RNase-freies ddH2O | 1,7 ml × 2 |
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| Kit-Komponenten (20 μl Reaktionssystem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2× Direkter qPCR-Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| 50× ROX-Referenzfarbstoff | 40 μl | 200 μl |
| RNase-freies ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
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